Observation of Barr bodies in dental pulp tissue and its relevance for sex estimation in a forensic context

Abstract

Introdução: A identificação humana de pode ser realizada utilizando métodos comparativos como o ADN e as impressões digitais, assumindo que os dados antemortem estão disponíveis. Contudo, quando o corpo está demasiado danificado, como em casos de grandes catástrofes, o procedimento pode tornar-se mais complexo. Nestas circunstâncias, a odontologia forense pode ser uma ferramenta muito útil, nomeadamente na determinação do sexo da vítima. Objetivo: O objetivo deste trabalho é desenvolver um protocolo simples para a determinação do sexo num contexto forense através da deteção dos corpúsculos de Barr em células da polpa dentária. Material e Métodos: Foi feita uma pesquisa bibliográfica para contextualizar o tema. Depois, aplicados protocolos histológicos e citológicos com coloração H&E ou imunofluorescência (usando um anticorpo para uma variante de histona- MacroH2A) em polpa dentária proveniente de indivíduos do sexo masculino e feminino, obtidas por acesso endodôntico em dentes previamente extraídos. Resultados: Foram observados corpúsculos de Barr em preparações citológicas e histológicas de polpa dentária feminina corada com H&E. Foi igualmente detetada uma marcação mais relevante por imunofluorescência nas amostras histológicas femininas, quando comparada com amostras do sexo masculino. Discussão/Conclusão: Embora, tenham sido observados corpúsculos de Barr com a técnica de H&E em polpa dentária extraída de pacientes do sexo feminino, este método não é, por si só, suficiente para a diagnose sexual. A imunofluorescência utilizando um anticorpo anti- Macro H2A é uma ferramenta promissora para detetar os corpúsculos de Barr, no entanto são necessários mais estudos, bem como a otimização do protocolo, para validar estas observações preliminares.

Introduction: Human identification can be performed using comparative methods such as DNA and fingerprints assuming antemortem data is available. However, when the body is too much damaged, such as in cases of major disasters, the procedure can become much more complex. In these circumstances, forensic odontology can be very useful, namely, to determine the sex of the victim. Objective: The objective of this laboratory research is to develop a simple protocol for sex determination in a forensic context through the detection of Barr bodies in dental pulp cells of extracted teeth. Material and methods: Bibliographic research was conducted to contextualize the subject theme. Then, different protocols (histological e cytologic with H&E staining or immunofluorescence, using an antibody for a histone variant - MacroH2A) were applied to dental pulp samples obtained by endodontic access on teeth previously extracted from males and females. Results: Barr Bodies can be observed in pulp cells as well as histological samples from female dental pulp, stained with H&E. Furthermore, the Immunofluorescence results, showed Increased labeling in female histologic samples, when compared to samples from male individuals. Discussion/Conclusion: Although Barr bodies were observed in female dental pulp using H&E staining, we believe that alone, this is not a suitable method to discriminate between males and females. Immunofluorescence using an antibody against histone variant H2A is a promising tool to detect Barr bodies, but more studies as well as the optimization of the protocol, are needed to validate these preliminary observations.