Relação funcional entre a proteína Bub3 do checkpoint mitótico e a proteína motora dineína na ligação cinetocoro-microtúbulos

Abstract

O checkpoint mitótico assegura a fidelidade da segregação cromossómica a cada divisão celular. Este mecanismo de controlo inibe a anafase até que todos os cromossomas estabeleçam uma ligação bipolar, através dos seus cinetocoros irmãos, com os microtúbulos provenientes de pólos opostos do fuso mitótico, culminando no seu alinhamento na placa metafásica, fenómeno designado de congressão. Algumas das proteínas do checkpoint mitótico, designadamente Bub1, BubR1 e Bub3, para além da sua função na via de sinalização do checkpoint, foram envolvidas na regulação da ligação cinetocoro-microtúbulos. No entanto, fica por esclarecer se esta função é directa ou implica uma relação com as proteínas que medeiam a ligação dos cromossomas aos microtúbulos, nomeadamente com as proteínas motoras dineína e CENP-E. Foi reportada, por sistema two-hybrid, uma interacção entre as proteínas Bub3 e dineína. Assim, propusemo-nos a caracterizar, por RNA de interferência em células humanas em cultura, a relação funcional entre as proteínas Bub3 e dineína na ligação cinetocoro-microtúbulos e na congressão. Os resultados mostram que a depleção, quer da Bub3 quer da dineína, originou placas metafásicas incompletas com vários cromossomas desalinhados, confirmando a importância destas proteínas na congressão. Contudo, a depleção simultânea das duas proteínas resultou na restauração de uma fracção significativa de placas metafásicas com todos os cromossomas alinhados. É sugerida uma relação antagonística entre as proteínas Bub3 e dineína na regulação da ligação cinetocoro-microtúbulos.